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蛋白質(zhì)純化 -八聯(lián)管離心機的新技術
是當代生物產(chǎn)業(yè)當中的核心技術。該技術難度、成本均高;例如一個生物藥品的成本75%都花在下游蛋白質(zhì)分離純化當中。常用技術有:
1、沉淀,
?。?、電泳:蛋白質(zhì)在高于或低于其等電點的溶液中是帶電的,在電場中能向電場的正極或負極移動。根據(jù)支撐物不同,有薄膜電泳、凝膠電泳等。
3、透析:利用透析袋把大分子蛋白質(zhì)與小分子化合物分開的方法。
?。?、層析:
a.離子交換層析,利用蛋白質(zhì)的兩性游離性質(zhì),在某一特定PH時,各蛋白質(zhì)的電荷量及性質(zhì)不同,故可以通過離子交換層析得以分離。如陰離子交換層析,含負電量小的蛋白質(zhì)首先被洗脫下來。
b.分子篩,又稱凝膠過濾。小分子蛋白質(zhì)進入孔內(nèi),滯留時間長,大分子蛋白質(zhì)不能時入孔內(nèi)而徑直流出。
5、超速離心:既可以用來分離純化蛋白質(zhì)也可以用作測定蛋白質(zhì)的分子量。不同蛋白質(zhì)其密度與形態(tài)各不相同而分開。